طراحی یک روش الایزای غیرمستقیم جهت غربالگری اسبها بر اساس توانمندی تولید آنتی ونوم اختصاصی علیه کفچهمار ایرانی

در این مطالعه یک روش الایزای غیرمستقیم طراحی گردید تا تیتر آنتی‌بادی تولیدشده در برابر سم مار کبری پس از هر مرحله تزریق اسب موردسنجش قرار گیرد. به‌منظور ایمن‌سازی اسب‌ها از فراکسیون‌های سمی زهرمار ناجا ناجا اکسیانا به‌عنوان آنتی‌ژن استفاده شد. این روش امکان آن را فراهم می‌کند که بتوان افزایش مقدار آنتی‌بادی در پاسخ به تزریق سم را موردبررسی قرارداد و از این طریق کارایی فرآیند ایمن‌سازی را ارزیابی کرد. به‌منظور طراحی الایزای غیرمستقیم، رقت های 50/1، 500/1 و 1000/1 از سرم کنترل مثبت و سرم کنترل منفی برعلیه غلظت های 5/0، 1 و mg/well 2 از سم استفاده شد.  غلظت mg/well 2  از سم و رقت 1:1000 از سرم برای ارزیابی آنتی ونوم انتخاب گردید. پس از راه اندازی سیستم الایزا، سرم های حاصل از خونگیری اسب ها مرحله به مرحله پس از تزریق سم مورد آزمایش قرار گرفت تا روند افزایش تیتر آنتی ونوم مورد ارزیابی قرار گیرد. میانگین جذب نوری سرم ها پس از تزریق سوم 213/1 بود؛ این مقدار 8/5 برابر میانگین جذب نوری نمونه ها پس از مرحله اول ایمن سازی است.  تمامی اسب ها پس از تزریق پنجم به تیتر مناسبی از آنتی ونوم رسیدند. نتایج بدست آمده نشان داد که الایزای طراحی شده می تواند برای سنجش مقدار آنتی ونوم سرمی اسب ها به ویژه در ابتدای ایمن سازی مورد استفاده قرار گیرد.